| 品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號(hào) | PC0020 |
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| 規(guī)格 | 50T/10*50T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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| 主要用途 | BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒 | | |
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Solarbio/索萊寶 PC0020 BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒
索萊寶 BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品貨號(hào)：PC0020
產(chǎn)品名稱：BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T/10*50T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
BCA Protein Assay Kit
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
規(guī)格：50T(500微孔) ; 10*50T（500微孔）
儲(chǔ)存條件：BSA附件-20℃，其它試劑RT，有效期1年
堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物，測(cè)定其在562nm處的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測(cè)結(jié)果，但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁，但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100μL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加PBS補(bǔ)足至20μL。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋（最好多做幾個(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時(shí)誤差偏大，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標(biāo)儀測(cè)定A562nm，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時(shí)，應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測(cè)結(jié)果。
二. 分光光度計(jì)法 如沒(méi)有酶標(biāo)儀，可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下：
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁，但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取100μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至1mL（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支（或者更多）5mL離心管，標(biāo)上號(hào)，按下表加入試劑。
離心管號(hào) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7（樣品管1） | 8（樣品管2） | 9（樣品管3） |
標(biāo)準(zhǔn)蛋白BSA | 0 | 40μL | 80μL | 120μL | 160μL | 200μL | 200μL適當(dāng)稀釋的樣品1 | 200μL適當(dāng)稀釋的樣品2 | …… |
PBS | 200μL | 160μL | 120μL | 80μL | 40μL | 0 | 0 | 0 | 0 |
BCA工作液 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml |
4.37℃放置15-30分鐘。用分光光度計(jì)測(cè)562nm處吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。
注意事項(xiàng)：
1. 長(zhǎng)期不用時(shí)，Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存，如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時(shí)，可37℃溫育使其wan全溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時(shí)，請(qǐng)采用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
索萊寶 BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒-常備現(xiàn)貨
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